血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中或许含有内源性HRP,也会发作假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其间的可发作聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻住血清融解后,蛋白质局部浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,防止气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振动。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。反复冻融会使抗体效价下跌,所以测抗体的血清标本如需保存作屡次检测,宜少量分装冰存。保存血清自收集时就应留意无菌操作,也可加入恰当防腐剂。
可用作ELISA测定的标本非常广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均平等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清自然凝固收缩后即可获得。除特殊情况外,在医学查验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可平等使用。血清标本可按常规办法收集,应留意防止溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本或许会增加非特异性显色。