细胞培养中的常见污染类型

凡是混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都可视为污染。细胞污染可分为三大类：微生物污染、细胞间交互污染和化学污染。

微生物污染：包括真菌、细菌、支原体和病毒污染。

细胞间交互污染：指的是非同种的其他细胞污染

化学污染：指影响细胞生存的非细胞所需的化学成分。

一、微生物污染

细菌和真菌污染是较容易发现的，而病毒、支原体和其他细胞系的污染是不容易被察觉的。

1. 细菌污染时培养液pH值改变，溶液变浑浊。细菌的大量增殖导致细胞液中营养大量消耗，并产生毒素抑制细胞的生长，终导致细胞崩解死亡。在有抗生素存在的条件下易造成隐性污染。

2. 病毒污染是难发现和清除的，对于实验人员也是一个潜在的危险因素，不过病毒具有严格的宿主性和自限性。

3. 支原体污染是一种比较严重的细胞污染，难发现难去除。该种污染在显微镜下看不到，不引起培养液浑浊和pH改变。由于支原体营养要求高，故不容易用传统的微生物培养法检测到。此外，支原体不能通过过滤清除，且大多数抗生素对其无效！

4. 真菌污染中多是毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等污染，易通过孢子传播。霉菌污染后多数在培养液中形成肉眼可见的白色或浅黄色漂浮物，短期内培养液不浑浊。显微镜下观察可见在细胞之间有纵横交错穿行的丝状、管状及树状菌丝。常规的抗生素、紫外线和酒精对真菌的灭菌效果较差，难以消除。真菌污染大部分是人为带进细胞间，或者空气环境造成。

二、细胞系交叉污染

细胞系交叉污染难于发现，当传代细胞出现生长速度异常时，可怀疑该种污染。预防该类型污染时，操作人员应同一时间只传一种细胞，每种细胞液要有单独的培养液，并且建立细胞库，每三个月更换一次细胞。