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人黑色素瘤贴壁细胞如何培养
发布日期：
2020-02-13
浏览人气：
1482
人黑色素瘤贴壁细胞培养方法如下：
1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后，仔细剥除脑膜、血管和纤维成分，置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍体积的Hanks液中，此时脑组织比较柔软，反复吹打即制成细胞悬液。
3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后，细胞或细胞团快自然下沉，脂肪等杂物易漂浮，可吸除上层、反复二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。
4、在沉降物中加入适量培养液，通过纱网成纱布过滤，计数并调整细胞密度。
5、接入培养瓶或皿中，置5%CO2温箱中培养。适应环境过程较长，接种后贴壁较慢。贴壁后短期内也可能不见细胞分裂现象，然而一旦生长后即能迅速进入旺盛的增殖状态。细胞传代可以0.25%胰酶消化处理。
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