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骨髓培养基检验方法

发布日期: 2020-04-20
浏览人气: 905
   骨髓培养基为细胞标本前处理试剂,用于骨髓细胞增殖培养,不具备对细胞的选择、诱导、分化功能,培养后的骨髓细胞用于体外诊断,该产品不用于治疗性用途。
  骨髓培养基检验方法:
  1. 种骨髓:向装有10ml培养基的玻璃或塑料瓶中接种0.5ml的骨髓穿刺液,轻轻转动培养管使混合。
  2. 培养:置37℃二氧化碳细胞培养箱培养72小时。
  3. 终止培养:向每个培养管中加入秋水仙酰胺溶液,终浓度为0.1ug/ml,静置15-30分钟。
  4. 收获细胞:将培养液转移至离心管中,离心力500g,离心5分钟。
  5. 低渗处理:除去上清液,加入5-10ml 0.075M KCl溶液重新悬浮细胞,37℃孵化10-12分钟。
  6. 离心:500g,离心5分钟,弃去上清液。
  7. 固定:固定液为醋酸:甲醇=1:3,每个离心管中逐滴加入新鲜配制的、预冷的固定液5-10ml。置于4℃10分钟。
  8. 再固定:重复步骤6和7。
  9. 滴片:加入0.5-1ml固定液制成悬液。用吸管吸取细胞悬液,滴至干燥洁净的载玻片上,空气中晾干。
  10. 经吉姆萨染色处理后做染色体核型分析。
  胎儿骨髓培养基保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。细胞服务流程:预约登记→办理相关手续→复苏细胞→细胞质量检查→发送细胞(或自己来取细胞)→细胞售后技术咨询答疑。
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