1.如何选用培养基?
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,MEM做粘附细胞培养 、RPMI-1640做悬浮细胞培养,各种目的无血清培养的是AIM V培养基(SFM)。
2.为什么要热灭活血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学 研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
3.L-谷氨酰胺在细胞培养 中重要吗?它在溶液中不稳定吗?
L-谷氨酰胺在细胞培养 时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。
4.GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定 ?
GlutaMAX-I二肽是L-谷氨酰胺的衍生物,将其不稳定的α-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅灭菌20分钟,GlutaMAX-I二肽溶液有小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎*降解。