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如何培养羊水细胞
发布日期：
2020-12-02
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体外的羊水细胞与绒毛膜培养是每一个细胞遗传学实验室的重点工作，因为核型分析所需的中期（metaphase）染色体有赖于获得处于分裂状态下的细胞。羊水穿刺与绒毛膜取样是现今主要的侵入性手段用于胎儿染色体异常的诊断。用于胚胎期诊断化验中人类羊水细胞和绒毛膜样品培养的*培养基，缓冲效果更佳。培养基冷冻包装。
采用如下方法做羊水细胞原位培养或按其它常规羊水细胞培养方法培养羊水细胞：
1、取羊水20ml，以120xg离心十分钟。
2、在无菌操作台操作，弃上清液。
3、加入2ml羊水培养基，轻轻 混匀，制成细胞悬液。
4、取35mm培养皿，在盖子上面及下半部侧壁都做好标记。（包括编号、姓名、日期等）
5、滴加0.5ml细胞悬液至培养皿中的盖玻片（25px2）中央，用移液管尖小心摊开。注意液体不能流出盖玻片。
6、将培养皿置于5% CO2、湿度饱和的37度培养箱进行培养。
7、24小时后，给每块盖玻片补加1.5ml培养基。
8、接种7天后观察细胞。当发现盖玻片上细胞克隆数大于10个，每个克隆细胞数大于300且克隆边沿细胞呈旺盛分裂状态时，即可收获细胞。否则，继续培养1~2天。当克隆边沿细胞融合度大于90%，呈现停止分裂状态时，意味细胞已经老化，不适合用作分析。
9、适合收获的细胞按常规方法使细胞分裂停止在有丝分裂中期并制作细胞片，经吉姆萨染色处理后做染色体核型分析。
17758005454
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