1.固定和麻醉
胎牛原血清采集的关键技术主要是怀孕母牛的剖腹产和太牛的全封闭无菌心脏穿刺采血,对怀孕8个月左右的母牛进行剖腹产,产前采用侧卧保定方法固定。麻醉采取全身麻醉和术部局部麻醉相结合的方法,确实有效的麻醉师顺利进行剖腹产的重要保障。
2.母牛剖腹,心脏穿刺
手术切口位置选择在左肷窝腹壁的上三分之一处,优点是靠近子宫角便于手术中缝合快速收缩的子宫,其次是内容物不易流入腹腔,减少腹腔被污染而带来腹,盆两腔感染引发生殖系统器质性病变的风险。因子宫收缩极快,故在胎牛取出的同时要快速缝合,然后进行心脏穿刺采血。
3.澳洲胎牛血清采集
采血前器具全部消毒,探明胎牛心脏搏动部位,消毒后针管垂直穿刺心脏采血。
4.采 血
胎牛血清采用心脏穿刺的方法采血,全部按照工业标准采血。
5.处 理
收集的血液均在冷藏条件下处理,血清和凝块分离后立即将血清合并并冷冻。
6.热灭活血清
热灭活是在56℃水浴中严格控温30分钟。
7.透析血清
用12,000~14,000截留分子量的透析膜对0.15M的NaCl进行透析直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶方法检测)。为防止沉淀和血清中多肽的灭活,不进行过度的透析,因此一些小分子量的可透析成分如氨基酸不一定*去除。
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货号:10270-106
品牌:Gibco
规格:500ml/瓶
保存温度:-20℃
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Gibco胎牛血清品牌:Gibco® | Life Technologies
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