经典培养基中不同成分的作用及选择原则

一般实验室在确定培养基种类后，还会遇到培养基有不同分型的情况。那么对于经典培养基中不同成分的作用及选择原则又是什么呢？请往下看 ～

1.葡萄糖（Glucose）：

作用：细胞生长所需的主要能量来源。

❖ 如何选择不同葡萄糖含量的培养基？

最初的 DMEM 中，葡萄糖浓度为 1 g/L，现在称其为低糖型 DMEM，适合培养多数哺乳动物细胞；

高糖型 DMEM 中的葡萄糖浓度为 4.5 g/L，适合生长速度快，附着性较差的肿瘤细胞；

使用无糖培养基的主要目的是，通过控制细胞的能量来源，研究细胞的代谢过程或葡萄糖利用效率

2.HEPES：

作用：pH 缓冲剂。

是一种氢离子缓冲剂，其作用不依赖于 CO2；

在一定范围内对细胞无毒性作用，能较长时间控制恒定的 pH 范围，保证细胞良好生长；

部分细胞对酸碱度的变化非常敏感，建议使用 HEPES；

根据需要，非必需。

3.L-谷氨酰胺（L-glutamine）：

作用：L-谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源，参与蛋白质的合成，也为合成核酸提供碳源。

❖ 存在的不足：

L-谷氨酰胺不稳定，在中性的水溶液中会自发降解；

降解产物氨对细胞有毒性；

对氨敏感的细胞（如干细胞和原代细胞等）或培养环境（高密度反应器，无补料的长期培养）不推荐含 L-谷氨酰胺的培养基。

❖ 解决方案：

选择不含谷氨酰胺的培养基，在使用前再添加 L-谷氨酰胺，并尽快用完；

选择稳定的谷氨酰胺替代物，如 glutaGRO。

4.酚红（Phenol red）：

作用：pH 值的指示剂（中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色）。

❖ 何时选择不含酚红的培养基？

培养干细胞或细胞克隆时倾向于不加酚红；

酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）；

酚红的颜色会干扰流式检测，不建议使用含酚红的培养基制备细胞样品（通常用 PBS）。

5.碳酸氢钠（Sodium bicarbonate）：

作用：pH 缓冲剂。

pH 6.8~7.8 为细胞生长的最佳 pH 条件；

多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲；

碳酸氢钠的缓冲需要 CO2；

1.高碳酸氢钠(1.5~3.7 g/L)需要 5~10% CO2 培养；

2.低碳酸氢钠（0.35 g/L）不需要 CO2 培养。

干粉培养基在配制时需要单独添加。

6.丙酮酸钠（Sodium pyruvate）：

作用：能量来源。

丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源；

葡萄糖不足的时候，细胞可以代谢丙酮酸钠；

保证细胞更好地生长；

根据需要，非必需组分。