产品名称WPMY-1细胞,人正常前列腺基质永生化细胞
详细说明
生长特性 贴壁生长
形态特性 上皮样
产品规格 1×10^6 cells/瓶
培养条件 DMEM-H+5%FBS+1%P/S
生长条件 气相:5%CO2 95% 空气 温度:37 ℃
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
背景资料 肌成纤维基质细胞株, WPMY-1, 与RWPE-1细胞一样,来源于同一张**前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。 通过一个pRSTV质料结构,用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。 WPMY-1细胞,与RWPE-1细胞及其它上皮细胞衍生株一样,属于来源于同一个前列腺的一系列细胞株。 由于它们来源于同一个前列腺的周围区域,WPMY-1细胞株对于研究分泌和基质与上皮细胞相互作用尤其有用。
胞常规说明:
WPMY-1细胞,人正常前列腺基质永生化细胞
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
一、 细胞复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 细胞传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
三、 细胞冻存
把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制: 70%的*培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
要注意的就是无菌操作!