Aspc-1人胰腺癌细胞

Aspc-1人胰腺癌细胞

细胞冻存:
1、取待冻存的细胞用胰酶消化，用培养基将细胞冲洗下来。800r/min离心5min，弃上清收集细胞。如果是悬浮培养的细胞，可直接离心收集细胞。
2、加入适量冻存液(10%甘油+90%培养基，或是10%DMSO+90%培养基)制成细胞悬液。细胞浓度宜大，3*106个/ml左右，并可适量增加小牛血清浓度至20%。
3、细胞悬液装入冻存管中。用胶布封裹，做好标记(注明细胞种类、时间、条件等)。
4、冻存管在4℃下存放30min，转放-20℃1.5h~2h，再转入-70℃4~12h后即可转入液氮内(-196℃)，注意进行登记。
复苏
1、取一搪瓷杯盛上适量自来水加热至40℃左右。
2、从液氮中取出冻存管立即投入40℃水中迅速解冻。
3、取出冻存管，用75%酒精清洁管口，打开。
4、离心去上清收集细胞，用无血清培养基洗1次，加入3ml新鲜培养基，于小培养瓶中培养。
5、每日观察细胞生长情况，如果死细胞较多，复苏次日应换液。待细胞长满后进行传代培养。

Aspc-1人胰腺癌细胞

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