DU145人前列腺癌细胞
种属 | 人 |
年龄(性别) | 男;69岁 |
组织来源 | 前列腺;转移灶;脑癌 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | DU 145细胞是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移病灶损害中建株的。DU 145细胞和从软琼脂中分离到的细胞不具有可检测的激素敏感性,酸性磷酸酶呈弱阳性。对DU 145细胞及原始肿瘤细胞的亚显微结构分析可见微绒毛,微丝及细胞桥粒,有许多线粒体,发育良好高尔基体和异质溶酶体。DU 145细胞不表达前列腺抗体。 |
生长培养基 | MEM(货号:PM150410)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
DU145人前列腺癌细胞
细胞接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml*培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、细胞取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室CRL-5870 NCI-H1435 Cells ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养*的技术支持,让您实验再无烦扰!
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