SGC-7901/DDP人胃癌顺铂耐药株
细胞特性
1) 来源:胃癌
2) 形态:上皮细胞样
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
SGC-7901/DDP人胃癌顺铂耐药株
根据细胞生长的特点,传代方法有3种:
(1)悬浮生长细胞传代
离心法传代:离心(1000转/分)去上清,沉淀物加新培养液后再混匀传代。
直接传代法:悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2-2/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。
(2)半悬浮生长细胞传代(HeIa细胞)
此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹。
打法使细胞从瓶壁脱落下来,进行传代。
(3)贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代,常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。xy-6437R ANKRD53锚蛋白重复域53抗体
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存