SV40-MES-13小鼠肾小球系膜细胞
种属 | 小鼠 |
年龄(性别) | 7-10周龄 |
组织来源 | 肾小球系膜细胞 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
背景描述 | SV40 MES 13细胞的细胞骨架染色突出呈现肌动蛋白,在细胞质中有丰富的平行微丝。有报道称,在1uM血管紧张素Ⅱ存在下,SV40 MES 13细胞会收缩。SV40 MES 13细胞在软琼脂中形成克隆;SV40大T抗原阳性。 |
生长培养基 | 71.25% DMEM高糖(货号:PM150210)+23.75% Ham's F-12(货号:PM150810)+5% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存