CL-14细胞

CL-14细胞

二、使用方法
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1.收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快和我们联系。
2.如包装完好，取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常，细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3h，以稳定细胞状态。
3.细胞状态稳定后，弃除培养瓶中大部分液体，只剩5-10ml左右培养液继续培养就可以了，超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。
如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3-5Min,吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4.细胞传代
1)吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS 2-3ml清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1.5ml至培养瓶中，37℃温浴1-2min左右;倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀，按1:2适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
三、注意事项
1.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作;
2.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态;
3.该细胞只可用于科研。
刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞稳定后
再调回10%即可
  收到细胞后如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要参考依据，请您务必重视。

CL-14细胞

稀释方法：

     方法1. 实验前，将冻干粉抗体用无菌蒸馏水稀释（或PBS稀释），将稀释后的抗体分装5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反复冻溶。

     方法2. 实验前,也可将冻干粉抗体用无菌蒸馏水稀释50ul（或PBS稀释50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。方法3. 预试验可做几个梯度1：100、200、400背景高还可做上去，选一个 的稀释比例，再正式做，效果。工作液的稀释-使用抗体稀释液。 公司产品经无数次市场验证，若出现质量问题可无条件换货或退货。

常用免疫组织化学方法的原理：

      1. 免疫荧光细胞化学技术：将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量。

       2. 免疫酶细胞化学技术：是目前免疫组织化学研究中zui常用的技术．基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。
       3. 免疫胶体金技术：就是用胶体金标记一抗，二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白）等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性，定位或定量研究．由于胶体金的电子密度高，多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。
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