L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞

L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞

细胞生长：悬浮

细胞形态：上皮细胞样

细胞数量：1×106个

细胞传代：1:3传代,2-3天传一代

细胞纯度：92.2％

细胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

细胞冻存：液氮冻存（*培养基+10%DMSO+20%FBS）

细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）

细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗

L-540 Hodgkin【人霍奇金淋巴瘤细胞】培养条件

1640,90%；**胎牛血清，10%

气相：空气，95%；二氧化碳，5%

温度：37摄氏度

传代方法

显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。

传代密度均匀，有以下几点比较重要：

1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹，一上来就加1-2ml胰酶，结果细胞团大片脱落，虽然有后续吹打步骤，但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞，怎么掌握分寸，还待自己摸索或其他战友分享。

2.在以上基础上，我觉得细胞吹匀，这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管，加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。

3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。

传代方法：1:3-1:8传代，每周换液2次。
细胞简称：COLO 205(COLO205)细胞
细胞名称：COLO 205(COLO205)；人结肠癌细胞
组织来源：结直肠腺癌，腹水转移
规    格：T25培养瓶，1×106cells
形态特征：贴壁/悬浮混合；上皮细胞样
生长特性：贴壁/悬浮混合
培养条件：RPMI-1640+10% FBS
传代方法：1:3-1:8传代，每周换液2次。
背景：该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的，该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4-6周，角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
细胞简称：MRC-5(MRC5)细胞
细胞名称：MRC-5(MRC5)；人胚肺细胞
组织来源：肺
规    格：T25培养瓶，1×106cells

L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞

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