形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:12;D18S51:18;D19S433:14;D21S11:29,32.2;D2S1338:18,19,27;D3S1358:14,17;D5S818:12;D7S820:8,12;D8S1179:12;FGA:24,25;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:15,16;
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
CL-0056CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞)5×106cells/瓶×2
β-半乳糖苷酶比色检测试剂盒GalC
Cates-1B细胞,人淋巴胚胎性癌细胞 SV40T转化的人胚肾细胞(亚系),293T/17细胞 食管上皮细胞Many types of cells包装:5 ×105次方(1ml)
大耳山羊肺细胞;LDG-1
SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人细胞裂解液 (阳性对照)
PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(低分化)
CL-0195RH-35(大鼠肝癌细胞)5×106cells/瓶×2
人肾皮质上皮细胞(HRCEpiC)( 5×105 )
人食管癌细胞;EC109 大鼠脑成纤维细胞*培养基 100mL
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3
SERPINA10 Others Mouse 小鼠 SERPINA10 / SerpinA10 / ZPI 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS
人胚胎绒毛细胞(HAF)(1×106 )
CM-R112大鼠小脑颗粒细胞*培养基100mL
小鼠癌细胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白细胞*培养基 100mL
人少突胶质细胞 Human
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人细胞裂解液 (阳性对照)
去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂250g用于沙门氏菌的分离培养
精氨酸肉汤 250g 用于游泳池中假单胞菌检测
菌种培养基 Strain Medium(for B.Cereus) 250 用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准)
5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶
NutrientAgar
Skirrow琼脂28385250g用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每基础培养基需添加2支配套试剂。(SR0330)
1901-prf MM-prf 小胶质细胞培养基 500 ml incubation media 1901-prf MM-prf 小胶质细胞培养基 500 ml
ThioglycollateMedium
BrainHeartInfusionBroth
C.L.E.D培养基添加剂 1ml*5支 每支加入100mlC.L.E.D培养基中
胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂26020250g广泛用于细菌的培养,特别用于食品中李斯特氏菌的分离培养(GB/T4789.30-20/T0005,I...
巯基醋酸盐肉汤 (另一USP配方) (CM0391) Oxoid incubation media 巯基醋酸盐肉汤 (另一USP配方) (CM0391) Oxoid
嗜麦芽寡养单胞菌 生产酸奶 支/瓶
LBNutrientAgar
琼脂培养基O 250g 用于金黄色葡萄球菌的分离培养。