Caski人宫颈癌细胞
【规 格】1株/1ML
【储存条件】低温保存
【产品商标】ATCC
【供应限制】仅供科研使用
细胞培养的准备工作一定要做充分,准备至少两套高温高压消毒后的物品,做新的操作时先检点所有的东西是否准备齐全,比如配液时的滤器,分装所用的容器是不是足够等等。所有实验物品,包括自己配的液体和购买的产品,都要标记清楚(比如名称,PH值、时间、还有自己的名字,如果是共用一个冰箱的话这一点很重要)。冻存的物品尽量避免反复冻融,如果无法避免,也要尽早分装,一次用完。细胞计数在开始培养时很有必要,但计数次数多了经验估计法也是很好的办法,必竟每次计数也不是那么精确,而细胞培养对计数也不是那么要求严格。 一瓶细胞培养用液体尽量不要反复使用,这将增大污染机率。可用的办法即是将其分装成适当规格,一次用1瓶。细胞培养板或瓶若要摞在一起的话,注意在箱内不要超过3层,否则,中间的会受热不均,严重影响细胞质量,可造成细胞生长不均匀,可能造成中间稀少,四周密集。
本公司是一家生物企业,满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求,其主营产品:ELISA试剂盒/人ELISA试剂盒/大鼠ELISA试剂盒/小鼠ELISA试剂盒/金标试剂盒/免疫组化试剂盒/标准品/科研抗体/生化试剂,生物培养基/细胞株/实验室耗材/动物血清等科研产品!
Caski人宫颈癌细胞
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决;2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决;3)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度;4)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的*培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。